问答题
证明膜蛋白具有流动性的实验证据有哪些?
【参考答案】
(1)细胞融合实验(荧光抗体免疫标记实验):用抗鼠细胞膜蛋白的荧光抗体(显绿色荧光)和抗人细胞膜蛋白的荧光抗体(显红色荧光)分别标记小鼠和人的细胞表面,然后用灭活的仙台病毒处理使两种细胞融合,10分钟后不同颜色的荧光在融合细胞表面开始扩散,40分钟后已分辨不出融合细胞表面绿色荧光或红色荧光区域,如加上不同的滤光片则显示红色荧光或绿色荧光都均匀分布在融合细胞表面。从而证实了膜蛋白具有流动性。
(2)淋巴细胞的成斑和成帽反应:在某些细胞中,当荧光抗体标记时间继续延长,已均匀分布在细胞表面的标记荧光会重新排布,聚集在细胞表面的某些部位,即所谓成斑现象,或聚集在细胞一端,叫成帽现象。这两种现象进一步证实了膜蛋白的流动性。
(3)光脱色恢复技术:用荧光素标记的膜蛋白,然后用激光束照射细胞表面某一区域,使被照射区的荧光淬灭变暗,由于膜蛋白的流动性,淬灭区域的亮度逐渐增加,最后恢复到与周围的荧光强度相等。从而证实了膜蛋白具有流动性。