问答题
计算题 简述由核基因组编码的线粒体蛋白是如何从细胞质运输到线粒体基质的?
【参考答案】
(1)核基因编码的蛋白质向线粒体跨膜转运与粗面内质网上合成的分泌蛋白不同,需在细胞质基质中合成前体形式,然后通过后转移方......
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请分析(共10分)1)为制备柠檬酸合成酶(CS),将牛心组织匀浆后,为什么先经差速离心法分离出线粒体后再进行下一步的纯化?(2分)2)将线粒体裂解,向裂解液中加入硫酸铵到一定的浓度,然后离心保留上清液;向上清液中再加入硫酸铵粉末至所需要的浓度,离心,倒掉上清液保留沉淀。这些操作的目的是什么?(2分)3)接着,将盐析所得到的CS粗制品对pH7.2的缓冲液透析,为什么不用水?透析的目的是什么?(2分)4)将上述处理所获得的CS粗制品进行分子排阻层析,在280nm下检测是否有蛋白被洗出,实验者保留第一个洗脱峰进行下一步的纯化。为什么?(2分)5)实验者将上步得到的CS样品又选用离子交换剂进行纯化,上样平衡后,该用高pH的缓冲液洗脱,为什么?(2分)
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