问答题

计算题 请分析（共10分）1）为制备柠檬酸合成酶（CS），将牛心组织匀浆后，为什么先经差速离心法分离出线粒体后再进行下一步的纯化？（2分）2）将线粒体裂解，向裂解液中加入硫酸铵到一定的浓度，然后离心保留上清液；向上清液中再加入硫酸铵粉末至所需要的浓度，离心，倒掉上清液保留沉淀。这些操作的目的是什么？（2分）3）接着，将盐析所得到的CS粗制品对pH7.2的缓冲液透析，为什么不用水？透析的目的是什么？（2分）4）将上述处理所获得的CS粗制品进行分子排阻层析，在280nm下检测是否有蛋白被洗出，实验者保留第一个洗脱峰进行下一步的纯化。为什么？（2分）5）实验者将上步得到的CS样品又选用离子交换剂进行纯化，上样平衡后，该用高pH的缓冲液洗脱，为什么？（2分）