问答题

简答题 PCR反应中对于加入的dNTP有什么要求?

【参考答案】

1.dNTP应具有一定浓度:50-200μmol/L,不得低于10-15。浓度过高会抑制Taq酶活性,较低浓度可降低错误掺入;高浓度dNTPs易产生错误掺入,而浓度过低会导致产量过低;
2.标准PCR中包含四种等摩尔浓度的脱氧核苷三磷酸,否则会诱导聚合酶错误掺入而降低产率、提前终止反应;
3.不能反复冻融,否则会降解。

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