问答题
A.引物长度一般在20~24bp(≥16,≤30):这样长度的引物保证了不易形成杂合体; B.(G+C)%含量:两段引物的此数值应相近;在已知模板序列时应与模板的相近。40%-60%; C.引物本身不能形成明显的次级结构,如发卡结构; D.两引物间不可发生互补(特别是3’端,若不可避免那3’端互补碱基不可超过2个碱基); E.引物3’端配对:引物3’端为DNA聚合酶连上寡核苷酸的地方,因此该端5-6个碱基与DNA的配对必须严格、准确。