单项选择题

原生质体纯化步骤大致有如下几步()。①将收集到的滤液离心,转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准,一般以500r/min离心15min.用吸管谨慎地吸去上清液。②将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中(除不含酶外,其他成分和酶液相同),再次离心,去上清液,如此重复三次。③将原生质体混合液经筛孔大小为40~100um的滤网过滤,以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质,收集滤液。④用培养基清洗一次,最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养。一般原生 质体的培养密度为104~106/ml。

A.①②③④
B.②⑧①④
C.③①②④
D.③②①④

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