单项选择题

如果将3’端羟基的可逆封闭用荧光基团来实现循环可逆末端终止测序,这一方法除完全满足Illumina现有特点外,将更有优势,因为其测序引物始终维持天然碱基状态,丝毫不影响后续测序反应。然而,这一方法没能的成功,其原因是()。

A.荧光保护基团单体的合成难度大
B.尚未发现合适的聚合酶
C.荧光保护基团的切割反应难度大
D.很难找到四种不同的荧光基团标记四种核苷酸单体