问答题

简答题 试述探针的设计原则。

【参考答案】

(1)针对同一待测靶基因的表达可设计若干探针序列,这些探针序列互相之间尽可能有最小覆盖,或者不覆盖
(2)应避免选择细胞中含量丰富的rRNA、tRNA的互补序列或相近序列作为探针
(3)探针长度一般为16bp~25bp,(G+C)%应在40%~60%以内,以减少非特异性杂交
(4)探针分子中避免互补的序列的存在,也要控制同一碱基的连续出现,否则分子内会出现“发夹”结构
(5)增加相近序列的参考寡核苷酸探针,提高检测信号的信噪比,可以提高检测的准确性与现实定量测定。

相关试题